反向斑点杂交技术检测泌尿生殖道沙眼衣原体及基因分型

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反向斑点杂交技术检测泌尿生殖道沙眼衣原体及基因分型
2006-10-11 11:10:08

（广州）为了建立反向斑点杂交技术，对泌尿生殖道沙眼衣原体感染进行检测和基因分型。研究者用0ligo软件设计寡核苷酸探针，采用巢式聚合酶链反应(PCR)扩增ompl基因的VS1-VS2序列，反向斑点杂交技术对沙眼衣原体进行检测和基因分型。结果巢式PCR扩增ompl基因的VS1-VS2序列的敏感性与质粒PCR符合率为98.2%(56/57)。优选出11条型特异性(A、B+Ba、C、D、E、F、G、H、I、J和K)和3条群特异性寡核苷酸探针:B群(B、Ba、D和E型)，C群(A、C、H、I、J和K型)和中间群(F和G型)。特异性经过基因库中的BLAST程序比较和试验优化，结果显示各探针均与标准株呈特异性杂交。56例VS1-VS2 PCR阳性的临床标本杂交法检测均阳性，共检出59株沙眼衣原体，包括8个基因型，其中以E、F、D和H型为主，占77.9%，分别为25.4%，22.0%，16.9%和13.6%。发现3例混合感染占5.4%，分别为D/E、D/F和F/K。可见反向斑点杂交技术简便且快速，可直接对临床标本沙眼衣原体进行检测和基因分型。

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