寡核苷酸阻断ROCK-1蛋白对人卵巢癌细胞恶性行为的影响

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寡核苷酸阻断ROCK-1蛋白对人卵巢癌细胞恶性行为的影响
2008-4-28 13:14:38

该项研究目的是通过反义寡核苷酸（ASODN）对ROCK-1的特异性阻断，探讨ROCK-1蛋白在卵巢癌转移中的作用。方法采用将ROCK-1反义寡核苷酸（ASODN）以脂质体介导，转染人卵巢癌细胞系SW626和Caov-3细胞，采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）与Western blot印迹法，检测转染前后ROCK-1蛋白的表达，Boyden小室观察ROCK．1ASODN对SW626和Caov-3细胞侵袭及迁移能力的影响，采用二苯基溴化四氮唑蓝（M1Tr）比色法，测定转染前后细胞增殖及黏附能力的变化。结果转染ROCK-1ASODN后，2株细胞内ROCK-1蛋白的表达明显减少，最大抑制率可达49．0％；细胞的侵袭能力受到明显抑制，10μmol／L组和20μmol／L组SW626细胞的侵袭能力分别为对照组的75．6％±3．8％和54．7％±2．9％，Caov-3细胞为68．8％±4．7％和50．0％±4．5％；转染2种浓度ASODN的SW626和Caov-3细胞的随机运动能力分别为对照组的80．0％±1．3％、63．7％±1．9％、72．0％±1．3％和55．9％±2．5％；定向运动能力分别为对照组的83．9％±1．4％、64．1％±1．3％、72．5％±3．4％和54．5％±1．9％。转染后2株细胞的体外黏附能力和增殖能力，均未显示出明显的变化。得出结论，ROCK．1蛋白的表达与人卵巢癌细胞的体外侵袭和迁移密切相关，阻断ROCK-1的表达，可有效地抑制卵巢癌肿瘤细胞的转移。

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