我学者首次发现抗HBV末端蛋白杂交瘤细胞系

    日前，第四军医大学基础部免疫学教研室赵玉红实验师等，采用经原核表达的乙肝病毒末端蛋白（HBV-TP）免疫BALB/c小鼠，通过取其脾细胞与骨髓瘤细胞SPS2/0融合克隆，从而成功地获得被命名为E3mAb、F5mAb和F7mAb并具有稳定分泌抗体的抗HBV末端蛋白杂交瘤细胞系。该杂交瘤细胞系的成功建立，为研究HBV感染的早期诊断及乙肝患者的生物治疗有着重要意义。

    据介绍，乙肝是由HBV感染所引起的全球性传染疾病。该病易于慢性化，并与肝癌的发生发展密切相关。近年来国际兴起的PCR检测新技术，因有某些局限性而不能作为病毒感染的早期指标。因此，研究HBV多聚酶mAb在HBV相关肝脏疾病诊断中的应用，建立抗HBV末端蛋白杂交瘤细胞系，以寻找HBV感染的最佳临床治疗方法，是目前国内外关注的热点和最活跃的新思路。

    研究人员采用经原核表达的HBV-TP免疫BALB/c小鼠，并通过取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合，接种培养。在进行筛选和克隆化的基础上，应用ELISA法检测出8个阳性克隆，经进一步扩大培养和反复克隆后，终于从这8个阳性克隆中精确地筛选出了阳性率达100%的3个克隆细胞（即杂交瘤细胞系）。这3株杂交瘤细胞系在100天的连续培养中，其mAb的分泌持续稳定，冻存细胞复苏后仍保持抗体分泌能力，其染色体数为99~116条，均有端着丝粒及标志染色体（中着丝粒染色体），DNA含量均高于SP2/0细胞，其分泌的mAb被分别命名为E3mAb、F5mAb和F7mAb。此外，此3株杂交瘤细胞系经免疫组化染色培养上清抗体效价为1誜100，腹水为1誜1000，其相应抗原在乙肝病毒及肝硬变组织中呈高表达（80%），而在正常肝组织中未见阳性反应，其抗原主要分布于细胞质内。提示该3株抗乙型肝炎病毒末端蛋白杂交瘤细胞分泌的mAb具有特异亲合性，其mAb分泌稳定，特异性强。

    据赵玉红介绍，HBV-P0L抗原及抗体可在多数HBV感染患者血清中出现，尤其是它们可出现于其他HBV血清学指标阴性的HBV感染的个体血清中，提示这一指标在某些病例中可能是惟一反映HBV感染或体内HBV低水平复制的重要标记物。该研究所获得的3株杂交瘤细胞系表明，阻断HBV-P0L基因编码的末端蛋白TP，对乙肝的防治具有重要的应用意义，为临床对HBV-TP为靶蛋白的主动性免疫治疗及基因治疗奠定了基础。