凝血酶调节蛋白基因对脐静脉内皮细胞抗凝功能的调控

    （南充）为了将含人凝血酶调节蛋白(hTM)基因的真核表达载体质粒pcDNA3.1/hTM转染体外培养的脐静脉内皮细胞(HUVECs)，观察外源凝血酶调节蛋白的表达及其所致的HUVECs抗凝功能的改变。研究者由阳离子脂质体介导将pcDNA3.1/hTM质粒转入内皮细胞中，半定量RT-PCR测定各组hTM mRNA的表达强度,免疫组化法检测hTM在内皮细胞膜上的表达；测定各组内皮细胞对蛋白C(PC)的激活；半自动凝血仪测定内皮细胞-PC反应液对正常血浆活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶原时间(PT)的影响。结果HUVECs pcDNA3.1/hTM质粒转染率约为10%，TM mRNA和TM蛋白的表达强度都有明显提高.重组质粒转染组、空载质粒组及未转染组PC反应液中活化蛋白C(activated protein C，APC)的含量分别是(2.80±0.43)μg/ml、(0.75±0.08)μg/ml、(0.85±0.11)μg/ml.APTT值在重组质粒转染组、空载质粒组、未转染组、未激活PC组和正常对照组中分别为(51.68±2.73)s、(38.38±2.44)s、(39.65±2.39)s、(33.93±1.73)s和(34.60±1.86)s。PT值在各组中分别为(21.89±1.66)s、(20.56±1.74)s、(20.42±2.04)s、(19.57±1.36)s和(20.16±1.35)s。可见pcDNA3.1/hTM质粒能被导入内皮细胞中，表达的TM分子具有生物学活性，能明显提高对PC的激活.激活的PC能明显抑制血浆内源性凝血途径使APTT延长，也使外源性凝血途径受到轻度抑制。 /**/