血管内皮生长因子反义核苷酸抑制大鼠角膜新生血管的实验研究

    （武汉）为了探讨重组腺相关病毒介导的血管内皮生长因子反义核苷酸(rAAV-aVEGF165)抑制大鼠角膜新生血管(CNV)发生与发展的作用。研究者三质粒共转染法构建rAAV-aVEGF165和重组腺相关病毒介导的β-半乳糖苷酶的结构基因(rAAV-Lacz)。48只SD大鼠用抽签法随机分成实验组和对照组，每组24只，碱烧伤方法诱导CNV生成。实验组结膜囊注射rAAV-aVEGF165(1010pfu/ml)，对照组结膜囊注射rAAV-Lacz(1010pfu/ml)；5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-gal)组织化学染色，检测Lacz基因在结膜囊中的表达情况；碱烧伤后1、2、4、7、14及30 d，形态学分析评价角膜新生血管的生长情况，免疫组织化学检测角膜组织中VEGF的表达。结果对照组rAAV-Lacz结膜囊注射2 d后，检测Lacz基因在结膜组织中的表达效率为21.36%±1.07%；30 d后Lacz基因在结膜下组织中的表达效率为28.02%±1.16%。碱烧伤后结膜囊注射rAAV-aVEGF165，实验组CNV面积明显减少，新生血管密度降低，VEGF在角膜组织中的表达明显降低，差异有统计学意义(F=1639.22，F=2187.16，F=719.17，P＜0.01)。可见rAAV-aVEGF165能显著抑制碱烧伤后CNV的形成，其机制与降低角膜组织中VEGF的表达有关，重组腺相关病毒是眼反义基因治疗的有效载体。 
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