74例肝豆状核变性患者中ATP7B基因七种新突变的发现

    （北京）为了分析中国人肝豆状核变性(Wilson disease，WD)患者ATP7B基因突变的分布特征，建立利用变性高效液相色谱(DHPLC)技术对Wilson病进行基因诊断的方法，并评价其在临床的应用价值。研究者对临床确诊为Wilson病的74例患者及50名健康人抽取外周静脉血提取基因组DNA。以患者和健康人的DNA为模板，分别对ATP7B基因的21个外显子进行PCR扩增。取PCR产物应用DHPLC技术在部分变性条件下检测突变并DNA测序证实突变位点。结果利用DHPLC技术筛查并经测序证实，共发现22种ATP7B基因突变类型，其中7种是新发现的，同时发现11种多态，其中3种是新发现的。第8外显子Arg778Leu突变率最高，其频率为25.0%。其次，2356-2A＞G突变频率为3.4%，Arg919Gly突变频率为2.7%，其他外显子突变频率均在1.0%～2.0%之间。可见 中国人的WD基因突变具有多样性特点，热点突变是第8外显子Arg778Leu。DHPLC具有高通量、敏感、准确且经济的特点，适合于大样本的筛查且能够发现未知的突变，是一种有临床应用价值的基因诊断技术。/**/