细胞内钙通过钙抑制的腺苷酸环化酶减低刺激肾素释放

    细胞内钙和cAMP是调节肾素释放的第二信使，cAMP通过肾小球旁(JG)细胞刺激肾素释放，而增高的细胞内钙可以抑制该效应。研究人员假定，通过激活腺苷酸环化酶的钙抑制亚型、增高cAMP和刺激肾素释放可以减低细胞内钙，为证实这一设想，研究者从C-57/B6小鼠原代培养JG细胞，当细胞在无血清培养基中生长至密度为70%，存在或不存在100 micromol/L 胞质钙螯合剂5'5-二甲基-1,2-二-(2-氨基苯氧基)-乙烷-N,N,N',N'-四-乙酸(BAPTA-AM)孵育2小时，以减低细胞内钙，采用放射免疫测定法确定JG 细胞cAMP含量和肾素释放。可见细胞内cAMP含量为4.04+/-0.92 pM/mL每毫克蛋白，BAPTA-AM孵育后增加by125+/-33% (P<0.01)。基线肾素为1.28+/-0.40 mg血管紧张素I每升每小时每毫克蛋白，BAPTA-AM可使其增加182+/-62% (P<0.025)。采用抗体进行蛋白印记法识别V 和VI型腺苷酸环化酶，发现约为135 kDa的特异的环带。当检验原代培养分离的JG细胞中的腺苷酸环化酶的钙抑制亚型，显示局部较强的胞质染色。针对肾素和腺苷酸环化酶V/VI型细胞染色显示细胞质内共区域化。腺苷酸环化酶抑制剂(SQ 22,536)完全阻断BAPTA-AM-刺激的肾素释放和JG 细胞内cAMP含量。因此，腺苷酸环化酶的钙抑制亚型存在于JG细胞内。因此，细胞内钙减低可以刺激腺苷酸环化酶，导致cAMP合成以及肾素释放。 /**/