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哮喘:支气管哮喘小鼠气道反应性无创检测方法的建立

【 2007-09-13 发布 】 临床报道  

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    广州医学院第一附属医院-广州呼吸疾病研究所(510120)

    目前国内在对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠的评价上多数仅仅立足于气道炎性指标,在气道反应性的检测方面近几年才起步,而且是用有创的方法。我所率先从国外引进了动物无创检测的肺功能仪。作为一种新兴、国内首次使用的方法,我们有必要探讨其与既往经典的有创法的相关性如何,是否能够有效检测动物的气道反应性,以期建立哮喘小鼠气道反应性的无创检测方法。

    首先,我们采用鸡卵清蛋白(OVA)致敏和激发,建立BALB/c 小鼠哮喘模型。具体分生理盐水对照组和哮喘模型组,每组18 只,分成10 只及8 只两部分,分别用无创和有创的方法测定气道反应性(分别用Penh-asthma组、Penh-ns 组、RI-asthma 组、RI-ns 组表示)经相应致敏激发后,用小鼠肺功能仪检测其气道反应性。雾化吸入0.2~50 mg/ml 倍增浓度的乙酰甲胆碱激发,测定相应浓度下的增强的呼气间歇(Penh)值或气道阻力(RI)值等指标。所有动物都行支气管肺泡灌洗,收集灌洗液,涂片染色后分类计数。最后测得 Penh-asthma、RI-asthma 组的嗜酸粒细胞(%)为55.00±1.41,显著高于对照组的0.44±0.62(P<0.01)。Penh-asthma 组PC100 均≤6.25 mg/ml,对照组PC100 均≥12.5 mg/ml。同时,其Log2(10PC100)值(5.36±0.84)显著低于对照组(7.97±0.82),两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。Penh-asthma组从Mch 为3.12 mg/ml 开始,其Penh 值明显高于对照组。RI-asthma 组的RI 值从0.39 mg/ml 开始就明显高于相应对照(P<0.05)。Penh-asthma 组与RI-asthma 组的气道反应性相关(r=0.962,P<0.01)。

    因此从气道炎性指标上看,Penh-asthma 组和RI-asthma 组的嗜酸粒细胞明显高于各自的对照组(P<0.01)。而本实验所制作的模型是参照我所于2006 年已成功制作的支气管哮喘模型,说明该模型的气道炎性有良好的重复性。而在气道高反应性的检测上,从PC100 的分布上看,Penh-asthma 组出现Penh倍增的Mch 浓度级都集中在低水平(PC100 均≤3.12 mg/ml),而对照组的明显集中在高浓度水平(PC100均≥25 mg/ml);Penh-asthma 组Log2(10PC100)值显著低于对照组(P<0.01),强烈支持Penh-asthma组存在气道高反应性,也体现了Penh 良好的检测效能。而将反映Penh-asthma 组和RI-asthma 组的气道反应性的Penh 值和RI 行相关分析,结果非常接近1(P<0.01),这就证实了2 种方法密切相关。此外,在检测小鼠气道反应性过程中,行无创法的小鼠不必麻醉,而且每次可以同时检测6 只小鼠,动态观察也不受限;这些在有创法中都无法实现。综上所述,以Penh 为主要测定指标的无创肺功能检测方法作为BALB/c 雌鼠气道高反应性的检测可行、高效。

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