中波紫外线辐射剂量与HaCaT细胞凋亡时相的相关性研究

      （南京）为了探讨中波紫外线(UVB)辐射角质形成细胞后，UVB辐射剂量与角质形成细胞凋亡时相的相关性，研究者以20，40，60，80，100和120 mJ/cm2的UVB辐射永生化人角质形成细胞株HaCaT细胞，检测辐射后2，12，24，48和72 h的细胞活性和细胞周期的变化，以及代表不同时相的凋亡通路：即应用广谱Caspase抑制剂VAD-FMK与凋亡细胞中活化的Caspase不可逆的结合检测早期Caspase介导的凋亡；应用Annexin V及PI双染方法检测后发的细胞膜介导的凋亡；以及应用DNA的梯度凝胶电泳检测晚期细胞核介导的凋亡。结果 UVB辐射可使HaCaT细胞的细胞周期受滞于G2/M期，G2/M期的百分比与辐射剂量成正比。细胞活性于24 h后与辐射剂量成反比。各时相的凋亡率均与辐射剂量成正比，但凋亡通路有明显的时相性：即早期(48 h内)由Caspase和细胞膜介导凋亡为主，晚期(48 h后)则由细胞核介导凋亡为主。可见 UVB诱导的角质形成细胞凋亡具有显著的剂量与时相依赖性特征，宜对其进行多指标、多时相的检测。/**/