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上海创建大规模细胞DNA转染技术平台

【 2005-08-11 发布 】 美迪医讯
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上海交通大学肿瘤研究所等单位的科研人员经过多年攻关,创建了大规模细胞DNA转染技术平台,通过该平台可直接筛出具有影响细胞生长、肿瘤发生发展相关基因,具有重要的潜在的应用与开发价值。该研究日前获得2004年上海市科技进步一等奖。

该研究项目为上海市科委发展基金重点项目,由上海交通大学肿瘤研究所、上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室和中科院上海生命科学院上海生物工程研究中心的顾健人院士、杨胜利院士、万大方研究员及龚毅研究员等共同完成。该研究创建了大规模细胞DNA转染技术平台,以人胎盘、胎儿及肝组织cDNA文库为材料,以人肝癌细胞SMMC-7721及小鼠NIH/3T3成纤维细胞为对象,以促进和抑制细胞克隆形成率及细胞灶形成率为指标,在基因组水平克隆筛选出对细胞生长有促进/抑制作用的基因,然后测序,进行生物信息学分析,最后确定其属性,同时建立了各种细胞芯片的技术平台。

研究中,在人胎盘、胎儿及肝组织三种cDNA文库铺板共15万个cDNA克隆,应用自行设计的"自身杂交"的负筛选技术,挑选出相对低丰度的克隆3万个,分别对肝癌细胞进行了29910个cDNA转染,对NIH/3T3细胞进行了22926个cDNA转染,共选出对细胞具有促进或抑制生长作用的基因3814个(8251个克隆),其中2836个(6958个克隆)属已知基因,372个(384个克隆)为新基因,待确定的序列598个(895个克隆)。

据悉,对具有促进或抑制细胞生长功能的372个新基因和新技术平台,已申请48项,至今已获国家34项(256个基因)。获得具有血清学诊断前景的候选基因两个、药靶候选基因两个、促进血管新生基因1个、基因治疗用候选基因3个。
本文关键字: 细胞DNA 
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