一种AAV介导的突变可有效抑制结肠癌生长

上海瑞金医院消化科涂水平等报告，重组腺相关病毒(AAV)载体介导的Survivin(Cys84AIa)突变可诱导结肠癌细胞凋亡和有丝分裂的异常，抑制肿瘤血管生成和肿瘤生长，有可能是一种有前途的结肠癌基因靶向治疗药物。(Gastroenterology 2005，128∶361)

Survivin是凋亡抑制基因家族的成员，并在大部分人类肿瘤中表达。Survivin的84位半胱氨酸残基突变(Cys84Ala)后，可导致有丝分裂异常和细胞凋亡。

研究者将突变的Survivin(Cys84AIa)，即Sur-Mut(Cys84Ala)克隆到腺相关病毒载体pAM/CAG-WPRE.ploy(A)上，构建了重组AAV-Sur-Mut(Cys84AIa)病毒。在体和离体情况下检测细胞的增殖、凋亡、有丝分裂异常和肿瘤生长情况。

结果显示，将rAAV-Sur-Mut(Cys84AIa)转导入体外培养的结肠癌细胞后，可抑制细胞增殖，呈剂量依赖性；诱导细胞凋亡，呈时间依赖性；Caspase-3等凋亡标记物活性增加，线粒体细胞色素C释放入胞浆；细胞有丝分裂异常，细胞分裂停滞在M期。

瘤内注射 rAAV-Sur-Mut(Cys84AIa)可显著抑制异种移植肿瘤的生长(4周后抑制程度达81.5%)。60天后肿瘤内仍可检测到高表达的突变Survivin蛋白，注射的肿瘤中有更多的凋亡细胞及核大而畸形(标志着有丝分裂异常)的细胞。rAAV-Sur-Mut(Cys84AIa)还可抑制肿瘤血管生成，同时对其他正常组织无明显的细胞毒作用。

rAAV-Sur-Mut(Cys84AIa)可增加结肠癌细胞对5氟尿嘧啶(5-FU)和顺铂等化疗药物的敏感性， rAAV-Sur-Mut(Cys84AIa)与5-FU联合应用，可显著增加5-FU的抗肿瘤活性，抑制肿瘤生长，使肿瘤消退。

该研究证实，重组腺相关病毒载体介导的Survivin(Cys84AIa)突变，尤其是联合其他化疗药物时，对结肠癌有潜在的治疗价值。以Survivin途径为目标的靶向治疗是抗血管生成和肿瘤治疗的新策略。