抑癌基因PTEN对肝癌细胞增殖的抑制及作用机制

   （西安）为了探讨抑癌基因PTEN对肝癌细胞增殖和细胞周期的调控作用。研究者构建野生型PTEN基因和突变型PTEN基因的真核表达载体pEGFP-WT-PTEN和pEGFP-PTEN,G129R。采用脂质体介导的基因转染法，分别将上述载体转染不表达PTEN蛋白的人肝细胞肝癌细胞系HHCC，经G418筛选，获得稳定表达PTEN蛋白的细胞克隆。以流式细胞仪测定细胞周期，以Western blot法分析稳定表达PTEN蛋白的肝癌细胞内源性的磷酸化AKT表达水平，同时与未进行基因转染和转染空载体pEGFP-C1的HHCC细胞进行对照。结果稳定表达野生型PTEN蛋白的肝癌细胞，细胞生长受到明显抑制，与转染空载体的HHCC细胞比较，G1期细胞比例显著增高，G2期和S期细胞比例显著降低，且差异有统计学意义(P<0.05)；而转染突变型PTEN基因的HHCC细胞，与转染空载体的HHCC细胞比较，差异无统计学意义(P>0.05)。与转染空载体的HHCC细胞比较，稳定表达野生型PTEN蛋白的HHCC细胞，其内源性磷酸化AKT水平明显减低；而转染突变型PTEN基因的HHCC细胞，其AKT水平无明显变化。可见野生型PTEN基因对肝癌细胞周期具有调控作用，而突变型PTEN 基因丧失对肝癌细胞周期的调控作用；野生型PTEN基因可能通过降低AKT的活化而实现对肝癌细胞周期的调控。/**/