细菌16SrRNA基因荧光定量PCR诊断新生儿败血症

    细菌16SrRNA基因荧光定量PCR诊断新生儿败血症，其检测快速、简便，为新生儿败血症提供早期、敏感的病原学诊断依据。 新生儿败血症是指致病菌进入血液生长繁殖，产生毒素而造成全身性细菌感染。有时在体内产生多发病源，形成严重病症。由于症状隐敝，又缺乏快速特异的诊断方法，给早期诊断造成困难，严重威胁着新生儿的健康和生命。 中华儿科杂志6月第6期刊登一项研究，研究者以细菌16SrRNA基因为靶序列，设计通用引物及TaqMan探针，建立细菌16SrRNA基因实时荧光定量PCR反应体系；选择临床引起新生儿败血症的常见菌如金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和大肠埃希菌等进行浓度梯度实验；对临床疑为新生儿败血症的830例感染性疾病的新生儿抽取静脉血分别做细菌16SrRNA基因荧光定量PCR和血培养检测。

     浙江大学医学院附属儿童医院中心实验室吴亦栋等研究人员研究显示，临床常见分离株金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌荧光定量PCR检测结果均为阳性；巨细胞病毒、EB病毒、乙肝病毒，新型隐球菌及白色念珠菌，人基因组DNA及空白对照均为阴性。细菌荧光定量PCR最低能检测到3个细菌，其荧光定量CT值为37．90；对临床疑为感染性疾病的830例患儿标本中，荧光定量PCR检测血标本阳性率5．18％（43／830），血培养阳性率2．41％（20／830），前者明显高于后者，差异具有统计学意义，P〈0．01，30例非感染性疾病患儿血标本荧光定量PCR检测及细菌培养均为阴性。若以血培养作为对照，荧光定量PCR方法的诊断敏感性为100％，特异性为97．16％，正确诊断指数为0．972。 因此可见细菌16SrRNA基因荧光定量PCR诊断新生儿败血症，其检测快速、简便，为新生儿败血症提供早期、敏感的病原学诊断依据。