磷脂酰肌醇3激酶抑制剂诱导猪卵巢颗粒细胞胰岛素抵抗的研究

    该项研究目的是观察磷脂酰肌醇3激酶（PI-3K）抑制剂――沃曼青霉素（wortmannin）诱导猪卵巢颗粒细胞胰岛素抵抗（IR）后，其信号传导通路中葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）、丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）基因表达的变化。方法采用猪卵巢颗粒细胞体外培养，分别以浓度为0、1．0、1．5、3．0、5．0μmol／L的wortmannin作用48h后，以氚标记葡萄糖法及葡萄糖氧化酶法检测细胞的葡萄糖消耗量，以免疫荧光法分析GLUT4、MAPK蛋白定位表达情况，以RT-PCR方法对GLUT4、MAPK的mRNA进行半定量分析。结果浓度为1．5μmol／L的wortmannin降低细胞对葡萄糖的摄取量最高达40％（P〈0.05），残余葡萄糖含量增多约13．76％，出现明显的IR。免疫荧光法结果显示GLUT4、MAPK蛋白主要在细胞质表达。RT-PCR结果提示，GLUT4基因表达水平降低21．06％，MAPK表达水平升高56．43％。由此得出结论wortmannin可干扰细胞内的糖代谢信号传导通路，诱导IR的发生；同时可放大有丝分裂信号传导通路。/**/