应用婴幼儿骨髓间充质干细胞体外构建组织工程化心肌

    该项研究目的是探讨以先天性心脏病（congenital heart disease，CHD）婴幼儿骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells，BMSCs）作为种子细胞于体外构建组织工程化心肌组织的可行性。方法采用分离培养CHD婴幼儿胸骨BMSCs，经5-氮杂胞苷诱导分化为心肌细胞，种植到可降解的载体――聚乳酸/羟基乙酸的共聚物（polyactic acid/glycolic acid homoconjugate，PLGA）上，加入含有10%胎牛血清的LG-DMEM培养液，摇床培养1周后种植到裸鼠背部皮下，分别在种植后1、2、3周处死裸鼠。实验终止后通过光学显微镜、常规HE染色、蛋白质印记（Western Blotting）和透射电镜观察等对构建的组织工程化心肌组织进行评价。结果骨髓间充质干细胞经定向诱导分化后与PLGA构建的细胞-支架复合体培养1周后可见大部分细胞存活，有大量的细胞外基质分泌，植入裸鼠体内后3周取出标本大体观察可见组织样结构形成，Western blot检测结果表明构建的心肌组织有心房利钠肽（ANP）和心肌特异性肌球蛋白重链（MHC）的表达，透射电镜下可见体外构建的工程化心肌具有肌丝，缝隙连接和闰盘样结构形成。得出结论以CHD要幼儿BMSCs为种子细胞，PLGA为支架构建组织工程化心肌可行，构建的组织工程化心肌具有自体心肌的特性。/**/