乳腺癌基因治疗研究进展介绍

乳腺癌的基因治疗是继手术、放疗、化疗和内分泌治疗之后发展的一种新的治疗手段。下面就这些基因治疗进展概况作一介绍。

免疫基因治疗

免疫基因治疗是指在基因水平，通过诱发或加强机体内针对肿瘤细胞表面的肿瘤相关抗原（TAAs）的特异性免疫反应，调动宿主的免疫系统来识别并破坏癌细胞。乳腺癌组织表达多种TAAs，包括HER-2/neu（c-erbB-2）、MACG-1和MUC-1等，机体针对这些TAAs产生一定的特异性体液和细胞免疫反应。目前应用于临床试验的免疫反应治疗有两种。

全肿瘤细胞疫苗科学家们将编码促进免疫反应的细胞因子的基因直接在体内转染到肿瘤细胞内，或在体外将这些基因转染到肿瘤细胞内，在肿瘤细胞经放射线照射灭活后，自身移植于体内，以增强免疫反应。目前应用该方面研究的免疫增强细胞因子包括IL-2、IL-12、干扰素、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）等。据国外报道，将GM-CSF在体外转染人乳腺癌细胞，灭活后制备疫苗，体外、体内动物实验均发现，可诱导肿瘤特异性免疫反应，疗效较直接外源性全身应用GM-CSF为好。目前研究将多种促进免疫反应细胞因子联合转入肿瘤细胞内或将细胞因子联合BT（嗜乳脂蛋白，由MHC编码）共刺激分子转染肿瘤细胞来制备疫苗，较单用一个细胞因子的疫苗更有效。

特异性靶抗原的免疫治疗采用特异的靶抗原作为疫苗比全肿瘤细胞作为疫苗用于增强对肿瘤的免疫反应更有效果。目前用于乳腺癌免疫治疗的特异抗原包括HER-2、CEA、MAGE-1、MUC-1等。科技人员采用基因工程将编码这些抗原的基因修饰后，克隆到逆病毒载体，转入体内；或在体外采用基因工程，将这些抗原的不同抗原簇克隆，产生不同抗体，筛选出能抑制肿瘤细胞生长的抗体。赫赛汀（Trastuzumab，Herceptin）就是针对c-erbB-2细胞外区域不同抗原簇的人单克隆抗体。它可有效抑制c-erbB-2的下游信号传导，从而抑制乳腺癌细胞的生长。

肿瘤抑癌基因治疗

野生型p53基因具有通过调控视网膜母细胞瘤基因控制细胞凋亡、抑制细胞增殖的作用。但是，由于乳腺癌细胞中p53易突变而失活，影响了p53基因治疗乳腺癌应用。在乳腺癌家族中发现抑癌基因BRCA1常存在突变而表达过低。实验表明，转入野生型BRCA1后，肿瘤细胞生长往往受限制。目前已知，在乳腺癌动物模型中采用装有BRCA1的逆病毒载体，直接注射入瘤内，可抑制晚期乳腺癌胸壁转移瘤的生长。

凋亡基因治疗

肿瘤细胞无限增殖，死亡数目减少。这一特征是与细胞正常凋亡途径调节失调有关。细胞生长因子和表皮生长因子受体（EGFR）、c-erbB-2、胰岛素样生长因子（IGF-1）表达过度，调节凋亡信息传导通路的促凋亡与抗凋亡因子、p53、Bcl-2（细胞周期蛋白）家族等异常表达，均在乳腺癌的发生中起重要作用。目前在临床开展的研究主要是抗凋亡的腺病毒基因E1A。1998年，美国研究人员将E1A用于晚期乳腺癌病人的Ⅰ期治疗，采用胸腔或腹腔内注射的方法（每周1次）。结果显示，胸腔积液、腹水中的肿瘤细胞计数减少，肿瘤细胞凋亡增加。

化学基因治疗

近年有将耐药基因，如多药耐药基因（MDR）转入造血干细胞，然后自体回输以增加化疗药物剂量，增强疗效，也不影响机体的造血系统。Cowan等将4例乳腺癌病人的造血细胞提取后，体外转染MDR基因，并且在体外应用大剂量化学药物杀死可能污染的肿瘤细胞后，将转染了MDR的造血细胞自身移植。给予大剂量的化学药物治疗后，3例病人移植细胞中仍可检测到MDR的表达，转染MDR的细胞存活率与骨髓抑制成反比，无严重毒副作用发生。

特异性肿瘤治疗是减少化疗耐药性的一种途径。药物前体激活基因治疗（GPAT）可以利用正常和肿瘤细胞之间的某一基因转录差异，选择性驱动表达导入肿瘤细胞内的无活性化疗药物前体转化为有活性的代谢产物，特异性杀伤肿瘤细胞。氟脲类药物对乳腺癌有杀伤作用，但5-氟胞嘧啶核苷酸（5-FC）作为药物前体，对细胞无杀伤作用，而它在嘧啶脱氨酶的转化下，可代谢为有活性的5-FU（5-氟尿嘧啶）而具有杀伤肿瘤细胞的能力。

另外，国内还有人在百余种化合物中筛选出一种名为维生素B17的化合物。维生素B17可以通过竞争性结合ATP，不可逆地抑制c-erbB-2活性，而不影响其蛋白表达。动物实验表明，维生素B17可使c-erbB-2过度表达的乳腺癌肿瘤缩小。

显性基因敲除治疗

乳腺癌基因治疗的方式之一是敲除显性的癌基因，削弱肿瘤的生长和浸润能力。国外研究表明，一种myc反义核酸对雌激素依赖型和非依赖型乳腺癌细胞均有抑制作用，转化生长因子α（TNF-α）的反义信使RNA能够抑制雌激素诱导的雌激素反应性乳腺癌细胞的增殖。反义核酸体外转化乳腺癌细胞能够下调c-erbB-2的表达并适当抑制细胞的增殖。

抗血管生成基因治疗

抗血管生成基因的因子包括内皮抑素、血管抑素和干扰素-α。本疗法机理是基于肿瘤和正常内皮细胞之间基因表达的差异，因而选择性抑制肿瘤内皮细胞中异常基因的表达，抑制肿瘤血管生成，从而达到治疗肿瘤的目的。Chen等用编码内皮抑素和血管抑素的质粒在体内有效地抑制了血管的生成，使肿瘤体积缩小分别为36%和49%。目前所知最强的血管生成细胞因子是VEGF，人们正致力于拮抗VEGF/VEGFR抗血管生成的研究。反义核酸，可溶性VEGFR、核糖酶、抗VECF单克隆抗体和受体酪氨酸激酶（RTK）抑制剂已被用于抗肿瘤血管生成的基因治疗。