人胰腺癌hedgehog信号转导途径中PTCH基因的克隆与鉴

【 2006-07-03 发布】　临床报道

（上海）为了克隆人胰腺癌hedgehog信号通路中PTCH基因，构建PTCH基因表达载体并诱导融合蛋白表达。研究者从人胰腺癌细胞株SW1990抽提总RNA，经R-PCR扩增出PTCH基因，经纯化、回收目的基因PTCH，将其插入表达载体PET22b，转化E.coliBL21-CodonPlusTM-RP，构建重组质粒PET22b/PTCH，IPTG诱导表达融合蛋白，免疫印迹进行鉴定。结果从人胰腺癌细胞株SW1990克隆出长为789 bp PTCH目的片段，成功构建重组质粒PET22b/PTCH，并诱导表达目的蛋白。可见构建重组质粒PET22b/PTCH，并表达PTCH融合蛋白，为制备PTCH多克隆抗体打下良好基础。/**/

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